2021年, 第28卷, 第3期　刊出日期：2021-03-25

  

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临床研究
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  T细胞斑点实验与培养液腺苷脱氨酶联合检测在结核快速诊断中的价值

  李秀玉, 刘文娜, 刘畅, 郭在广, 王红彦, 王培昌

  标记免疫分析与临床. 2021, 28(3): 361-364. https://doi.org/10.11748/bjmy.issn.1006-1703.2021.03.001

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  目的 使用T细胞斑点实验(T-SPOT)配合淋巴细胞培养液中腺苷脱氨酶(ADA)的检测,研究二者联合应用对结核菌感染快速检测的价值。方法 随机选取原发性肺结核、结核性胸膜炎、儿童肺结核和中枢神经系统结核患者,进行T-SPOT、淋巴细胞培养液ADA、血清ADA、胸水ADA及脑脊液ADA等检测。结果 原发性肺结核等结核组患者组的血清ADA、胸水ADA和20 h培养液ADA均显著高于对照组(P<0.05),但疾病组间差异无统计学意义(P>0.05)。在相应时间点检测淋巴细胞培养液ADA可有效诊断原发性肺结核、结核性胸膜炎、儿童肺结核及神经系统结核。培养液ADA检测能将结核性胸膜炎和儿童肺结核的诊断时间由单纯T-SPOT的20 h缩短至8 h。结论 在进行T-SPOT试验的同时进行淋巴细胞培养液的ADA检测能提高检测的时效性,二者联合应用能有效提高对结核病的诊断效能。
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  2型糖尿病患者骨代谢标志物变化的研究

  马瑞敏, 吕虹, 刘杰, 陈燕, 刘竞争, 邵春青, 张国军

  标记免疫分析与临床. 2021, 28(3): 365-369. https://doi.org/10.11748/bjmy.issn.1006-1703.2021.03.002

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  目的 探讨2型糖尿病(type 2 diabetes mellitus,T2DM)患者骨代谢标志物的变化及其与血糖、血脂代谢的相关性。方法 选取203例T2DM患者作为研究对象,选取同期体检的210例健康人作为对照组,分别测定各组骨代谢指标包括25-羟维生素D[25-hydroxyvitamin D,25(OH)D]、总Ⅰ型胶原氨基端延长肽(totalⅠtype collagen amino peptide,TP1NP)、骨钙素(osteocalcin,BGP)、β胶原特殊序列(beta isomerized C telopeptide,β-CTX)等,血糖指标包括糖化血红蛋白(glycosylated hemoglobin,HbA1c)、空腹血糖(fasting blood glucose,FBG)等,钙磷代谢指标包括钙离子(calcium ions,Ca²⁺)、磷(phosphorus,P)等、脂代谢指标包括三酰甘油(triglyceride,TG)、胆固醇(cholesterol,CHO)、低密度脂蛋白(low density lipoprotein,LDL)、高密度脂蛋白(high density lipoprotein,HDL)、载脂蛋白A1(apolipoprotein A1,APOA1)、载脂蛋白B(apolipoprotein B,APOB)等水平,分析T2DM患者25(OH)D、TP1NP、BGP、及β-CTX与其余各指标的相关性。结果 T2DM组患者TP1NP、BGP、β-CTX、25(OH)D、 Ca²⁺、CHO、LDL、HDL、APOA1水平均低于对照组(P<0.05),HbA1c、FBG、P、TG水平高于对照组(P<0.05),APOB水平在两组差异无统计学意义(P>0.05)。Spearman相关分析结果显示,T2DM患者25(OH)D水平与FBG、TG、CHO、LDL呈负相关(P<0.05),BGP水平与P、HDL、APOA1呈正相关(P<0.05),TP1NP、β-CTX水平与各指标无相关性(P>0.05)。结论 T2DM患者骨代谢标志物水平变化显著,25(OH)D及BGP可能参与血糖及血脂代谢调节过程。
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  联合检测APOB和CYFRA21-1在乳腺癌筛查中的临床意义

  席杰, 冯杰, 魏雪梅, 高艳红, 赵晓静

  标记免疫分析与临床. 2021, 28(3): 370-373. https://doi.org/10.11748/bjmy.issn.1006-1703.2021.03.003

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  目的 探讨载脂蛋白B(apolipoproteins B,APOB)和细胞角蛋白19片断(cytokeratin-19-fragment,CYFRA21-1)在乳腺癌早期筛查中的意义。方法 收集 2018 年 1 月至 2020 年 10月在解放军总医院第一医学中心确诊为原发性乳腺癌的患者(109例)、以及年龄匹配的乳腺良性病患者(98例)和健康对照(193例)的临床资料,对其血脂水平及肿瘤标志物等检查结果进行统计学分析。结果 单因素统计分析显示,乳腺癌患者总胆固醇(total cholesterol,TC)、低密度脂蛋白胆固醇(low density lipoprotein,LDL)、APOB水平显著低于乳腺良性病组(P<0.05)和健康对照组(P<0.05),其CYFRA21-1水平显著高于乳腺良性病组(P<0.05)和健康对照组(P<0.05)。二元Logistic回归分析结果显示,APOB是乳腺癌的保护因素、CYFRA21-1是乳腺癌发生的独立危险因素(P<0.05), APOB每增加一个单位,乳腺良性病患者患有乳腺癌的概率将降低96 %(P<0.05);CYFRA21-1每增加一个单位,乳腺良性病患者发生癌症的概率增加0.79倍(P<0.05)。APOB、 CYFRA21-1及其联合检测的 ROC 曲线下面积(AUC)分别为 0.681、0.660及0.714,其中APOB和 CYFRA21-1联合诊断鉴别乳腺良性病及乳腺癌的概率最高,其灵敏度和特异性分别为 79.8 % 和 65.7 %,95 %可信区间(95%CI)为0.629~0.798。结论 联合检测血清中的APOB和 CYFRA21-1,可以作为鉴别乳腺癌及乳腺良性病的早期筛查指标。
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  110例肺脓肿致病菌及药敏分析

  张杜超, 庞莉, 刘佳, 黄爱本, 潘磊

  标记免疫分析与临床. 2021, 28(3): 374-378. https://doi.org/10.11748/bjmy.issn.1006-1703.2021.03.004

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  目的 探讨引起肺脓肿的病原菌分布及耐药情况, 指导临床抗生素的合理应用。方法 回顾分析我院2011年8月至2018年9月收治的110例肺脓肿的感染致病菌及药敏结果。结果 110例肺脓肿患者中,有102例伴基础疾病,其中2型糖尿病26例、恶性肿瘤26例、脑血管后遗症14例、慢性阻塞性肺疾病8例、冠心病14例、肾功能不全8例、支气管扩张6例、支气管哮喘4例、机化性肺炎2例、合并肝脓肿6例。共分离出革兰阴性菌90株(81.8%),常见致病菌为肺炎克雷伯菌、鲍曼不动杆菌、铜绿假单胞菌、大肠埃希菌和流感嗜血杆菌, 对常用抗生素的敏感性为:美罗培南70.6%、亚胺培南62.2%、头孢哌酮/舒巴坦63.6%、哌拉西林/他唑巴坦48.6%、头孢吡肟53.3%、环丙沙星43.2%、阿米卡星62.2%、复方新诺明40.5%、米诺环素55.2%、氨曲南35.3%、多粘菌素B 100.0%。分离出革兰阳性菌20株(18.2%),其中金黄色葡萄球菌18株、α溶血链球菌2株。共检出MRSA 10株,对利奈唑胺、万古霉素、替考拉宁、替加环素的药物敏感性均为100%。结论 在肺脓肿的起始经验性治疗时, 对于合并有糖尿病、结构性肺病、脑血管病等基础性疾病的,应尽早选用广谱高效的β内酰胺类抗生素,以有效控制感染,必要时联合阿米卡星、多粘菌素B等治疗,当培养结果出来后,尽可能选择窄谱抗菌药物。
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  3岁儿童血清铁、不饱和铁结合力、总铁结合力、叶酸、维生素B₁₂参考区间的建立

  南京柱, 李秀娟, 张旭, 郑荣, 门莎莎, 董矜, 郭广宏, 田亚平

  标记免疫分析与临床. 2021, 28(3): 379-384. https://doi.org/10.11748/bjmy.issn.1006-1703.2021.03.005

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  目的 建立3岁儿童血清铁(IRON)、不饱和铁结合力(unsaturated iron binding capacity, UIBC)、总铁结合力(total iron binding capacity, TIBC)、叶酸(Folate)、维生素B₁₂(vitamin B₁₂, VB₁₂)参考区间。方法 收集2015年8月我院进行入幼儿园查体的226例3周岁儿童血清IRON、UIBC、TIBC、Folate和VB₁₂检测结果,并建立参考区间。结果 经离群值检测血清IRON缺失5例,剔除1例样本;UIBC缺失5例,剔除1例样本;TIBC缺失5例,剔除1例样本;Folate缺失1例,无剔除样本;VB₁₂无缺失和剔除样本;男童与女童UIBC(P=0.029)与TIBC(P=0.015)差异具有统计学意义(P<0.05),血清IRON、Folate和VB₁₂等3项男童与女童之间差异无统计学意义(P>0.05);相关性分析结果显示,血清IRON与UIBC呈负相关(r=-0.532,P<0.001);Folate与VB₁₂呈正相关(r=0.373,P<0.001);UIBC与TIBC呈正相关(r=0.783,P<0.001)。 3岁儿童参考区间分别为IRON(6.4~29.9μmol/L)、UBIC(男童:30.9~67.6μmol/L;女童:29.3~65.2μmol/L)、TIBC(男童:51.5~81.1μmol/L;女童:50.0~81.3μmol/L)、Folate(6.6~20.0 ng/mL)和VB₁₂(306.6~1 721.4 pg/mL)。结论 建立3岁儿童血清IRON、UIBC、TIBC、Folate和VB₁₂参考区间对正确评估儿童发育、疾病诊断和治疗效果具有重要临床意义。
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  北京市昌平地区5 068例过敏原特异性IgE抗体检测结果分析

  万极硕, 卢山, 杨凯楠

  标记免疫分析与临床. 2021, 28(3): 385-390. https://doi.org/10.11748/bjmy.issn.1006-1703.2021.03.006

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  目的 分析北京市昌平地区的过敏原分布特点及规律,为过敏性疾病的预防与治疗提供流行病学资料和临床诊断依据。方法 应用免疫印迹法检测5 068例受检者血清中26项过敏原特异性IgE抗体,按照不同季节、性别、年龄、年份分组统计过敏原检测结果阳性率,从而分析过敏原分布的特点及规律。结果 5 068例过敏原检测患者中,共2 576例过敏原特异性IgE抗体检测结果阳性,阳性率为50.83%,吸入性过敏原检测结果阳性率前五名为屋尘螨/粉尘螨(24.84%)、艾蒿(7.44%)、混合草(6.95%)、葎草(5.03%)、猫毛皮屑(4.74%);食入性过敏原检测结果阳性率前五名为牛奶(11.01%)、鸡蛋白(7.36%)、花生(6.16%)、龙虾/扇贝(2.84%)、黄豆(1.82%)。通过分组统计过敏原检测结果阳性率,分析显示吸入性过敏原高于食入性过敏原、夏季和秋季高于春季和冬季、男性高于女性、未成年(<18岁)高于成年(≥18岁)、2017年至2019年逐年降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 本文在一定程度上反映了北京昌平地区的过敏原分布特点及规律,为临床提供诊断与治疗的依据,为患者提供有效避免接触过敏原的帮助。
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  狗毛、猫毛过敏患者特异性IgE水平分析

  孔瑞, 李赫, 李雪梅, 黄旭, 赵义

  标记免疫分析与临床. 2021, 28(3): 391-394. https://doi.org/10.11748/bjmy.issn.1006-1703.2021.03.007

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  目的 了解北京地区不同年龄、性别过敏患者对狗毛、猫毛过敏原的敏感性差异。方法 本研究采用回顾性横断面研究,纳入我科2016年10月至2020年1月因过敏性疾病就诊患者2 092例。对狗毛和猫毛过敏患者的比例、性别、年龄以及sIgE水平进行比较,并对上述因素之间的相关性进行分析。结果 狗毛过敏总阳性率明显低于猫毛(P=0.042)。狗毛过敏患者年龄明显高于猫毛患者(P=0.001)。对于狗毛sIgE水平,狗sIgE+组明显低于狗-猫sIgE+组(P=0.004);对于猫毛sIgE水平, 猫sIgE+组明显低于狗-猫sIgE+组(P<0.001);狗毛和猫毛sIgE水平比较,狗-猫sIgE+组中狗毛低于猫毛(P=0.008)。狗sIgE+组患者中,女性比例高于男性(P=0.001);猫sIgE+组和狗-猫sIgE+组患者中,女性年龄均高于男性(均P=0.019)。结论 狗毛sIgE的阳性率和血清sIgE水平均低于猫毛,但狗毛过敏患者年龄高于猫毛。女性患者更容易出现单一狗毛过敏,猫毛过敏者中女性年龄更大。
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  ¹⁸F-FDG PET/CT体积代谢参数对口腔癌预后价值的研究

  蔺楠, 任超, 张桂, 周鑫, 童冠圣, 文哲

  标记免疫分析与临床. 2021, 28(3): 395-401. https://doi.org/10.11748/bjmy.issn.1006-1703.2021.03.008

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  目的 探讨术前测定¹⁸F-FDG PET/CT肿瘤代谢体积(metabolic tumor volume, MTV)和糖酵解总量(total lesion glycolysis, TLG)对口腔癌患者的预后价值。方法 对83例经手术病理证实的口腔癌患者进行术前¹⁸F-FDG PET/CT检查。测量原发肿瘤的最大标准摄取值(maximum standardized uptake values, SUVmax)、MTV和TLG。分析临床病理特征、影像学指标与无进展生存期(progression-free survival, PFS)、总生存期(overall survival, OS)的相关性,并对OS和PFS进行单因素Cox回归和Kaplan-Meier生存分析。通过受试者操作特征曲线(receiver operating characteristic, ROC)和决策曲线分析(decision curve analysis, CA)评价PET/CT代谢参数对口腔癌患者的预后价值。结果 PFS和OS与解剖部位、病理类型、病理分级及临床TNM分期有显著相关性(P<0.05)。单因素Cox回归分析显示MTV和TLG是PFS和OS的重要预后因子(P<0.01)。SUVmax与PFS和OS无显著相关性(P>0.05)。MTV和TLG的中位数分别为6.1(1.0~47.3)mL和47.2(6.6~813.3)g,口腔癌患者的单变量生存分析表明大于中位数的MTV(P<0.01)和TLG(P=0.018)是PFS和OS不良的显著预测因子。在临床病理学特征中加入MTV和TLG代谢参数可使PFS率的曲线下面积(area under curve, AUC)从0.887提高到0.908(P<0.05),OS率的AUC从0.837提高到0.873(P<0.05),同时DCA也显示出联合MTV和TLG对提高预后预测的临床价值。结论 术前测定¹⁸F-FDG PET/CT基于体积的代谢参数MTV和TLG对口腔癌判断预后有重要意义。此外,与临床病理特征相比,联合MTV和TLG可提高对口腔癌患者的预后价值。
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  北苑地区儿童冬春季社区获得性肺炎非细菌性病原体流行病学分析

  王丹, 孙树荣, 曲芬

  标记免疫分析与临床. 2021, 28(3): 402-405. https://doi.org/10.11748/bjmy.issn.1006-1703.2021.03.009

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  目的 儿童冬春季社区获得性肺炎是常见病,通过对北京朝阳区北苑地区儿童社区获得性肺炎非细菌性病原体统计研究,为进一步规范诊疗提供参考,提高临床救治率。方法 收集北苑地区2018年11月1日至2019年4月30日期间有社区获得性肺炎临床表现(发热、咳嗽)的门、急诊确诊患儿病例,统计分析血常规及咽拭子的检查结果,探讨儿童冬春季非细菌性病原体感染所致社区获得性肺炎流行病特征以及病原与血常规、C反应蛋白的关系,优化儿科感染患儿诊治的规范。结果 2018年11月1日至2019年4月30日期间11月、12月为非细菌性病原体感染所致社区获得性肺炎高发期,占总确诊人数的71.68%;≤1岁婴儿感染人数最多,7岁以内学龄前儿童占87.34%;感染人数最多的为肺炎支原体和呼吸道合胞病毒,占比分别为55.16%和32.42%。确诊患儿白细胞升高比例为23.35%,中性粒细胞百分比增高比例为9.57%,C反应蛋白增高比例为23.60%,三项指标同时增高比例为2.98%。结论 北京北苑地区儿童冬春季非细菌性病原体感染所致社区获得性肺炎儿童以学龄前儿童居多,病原以肺炎支原体、呼吸道合胞病毒为主,且多数确诊感染患儿血常规白细胞,中性粒细胞、C反应蛋白不升高,应根据流行病学特点重视学龄前社区获得性肺炎儿童的诊疗,尤其应重视血象不高但有临床表现的患儿,同时应考虑混合感染的情况,避免诊疗不全面。
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  B群链球菌显色培养基在孕产妇感染中的检测效果分析及对母婴健康的影响研究

  宋建梅, 李晓阳, 隗功泽, 张宇, 王海鹏

  标记免疫分析与临床. 2021, 28(3): 406-409. https://doi.org/10.11748/bjmy.issn.1006-1703.2021.03.010

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  目的 探讨B群链球菌(GBS)显色培养基在孕产妇感染中的检测效果及对母婴健康的影响。方法 选择2016年3月至2019年2月孕产妇感染患者126例作为对象,所有患者入院后均完成阴道分泌物和肛周分泌物采集,采用血平板(BAP)和B群链球菌选择性显色培养基(STRB)筛查孕产妇感染情况,并完成药敏试验进行常规耐药性分析;对入组孕妇进行随访,直到胎儿娩出,记录孕妇(早产、流产、产褥感染、胎膜早破)、新生儿不良妊娠结局(胎儿窘迫、窒息、肺炎及上呼吸道感染)发生率。结果 126例标本中,用BAP共培养出感染GBS患者24例,感染率为19.05%。用STRB共培养出感染GBS患者30例, 感染率为23.8%。结果表明STRB用于GBS的筛查效果优于BAP。药敏试验结果表明,鉴定的B群链球菌30株中耐药率排在前三位的分别为:克林霉素、红霉素及左氧氟沙星,分别为66.67%、50.00%及16.67%;30例感染GBS患者中孕妇影响排在前两位的分别为早产与胎膜早破,分别占25.00%和8.33%;新生儿中以上呼吸道感染为主,占8.33%。结论 围产期B群链球菌感染会影响母婴健康,增加不良妊娠结局发生率,加强病原菌鉴定及药敏试验,给予敏感抗生素干预能提高围产期母婴健康。
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  孕中期血清学检测联合超声NT筛查在唐氏综合征诊断中的应用价值

  苏立, 刘素娜, 贾晨路, 王军, 王丽雯, 吕书博, 赵德华

  标记免疫分析与临床. 2021, 28(3): 410-413. https://doi.org/10.11748/bjmy.issn.1006-1703.2021.03.011

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  目的 分析在孕中期唐氏综合征(DS)检查中应用血清学指标联合超声检测胎儿颈项透明层(NT)的临床价值。方法 选取本院2018年1月至2020年6月的就诊的17 338例孕妇作为研究对象。入选孕妇在孕早期开展超声波检测NT,在孕中期进行母体血清甲胎蛋白(AFP)、游离人绒毛膜促性腺素ß亚基(free β-HCG)和游离雌三醇(uE3)的检测。运用风险评估软件分析孕中期血清学检测联合超声NT筛查在同一个体孕妇中对唐氏综合征诊断效能的影响。结果 在17 388例孕妇中,孕中期血清学检测出DS高危患者792例,确诊22例,患病率为0.13%,初筛阳性率为4.57%。孕中期的血清学检测检出率为63.64%,血清学联合NT筛查对DS检出率为81.82%,二者差异具有统计学意义(χ²=6.23,P=0.03)。联合筛查的灵敏度和特异性均高于血清检测。结论 孕中期血清学检测联合超声NT筛查对诊断DS具有较高的灵敏度和特异性,可以更加准确地预测孕妇的不良妊娠发生率,具有良好的临床应用价值。
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  外周血NLR、LMR对睾丸原发性弥漫性大B细胞淋巴瘤患者预后的预测价值

  林樟萍, 陆喆, 王敏, 肖美芳

  标记免疫分析与临床. 2021, 28(3): 414-422. https://doi.org/10.11748/bjmy.issn.1006-1703.2021.03.012

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  目的 探讨外周血中性粒细胞与淋巴细胞比值(neutrophil/lymphocyte ratio, NLR)、淋巴细胞与单核细胞比值(lymphocyte/monocyte ratio, LMR)对睾丸原发性弥漫性大B细胞淋巴瘤(diffuse large B-cell lymphoma, DLBCL)患者预后的预测价值。方法 收集2005年1月至2015年1月本院确诊的28例睾丸原发性DLBCL 为研究对象,采用受试者工作特征曲线(receiver operating characteristic curve,ROC)分析NLR、LMR预测睾丸原发性DLBCL患者的无进展生存率(progression-free survival, PFS)、总生存率(overall survival, OS)最佳截点,并根据此节点将患者分为高比值组和低比值组。采用Kaplan-Meier法、单因素及多因素Cox回归分析影响患者PFS、OS的独立危险因素。结果 患者PFS、OS差异最具统计学意义的LMR cut-off 值是3.39、3.31,NLR cut-off值是2.49、2.66,NLR≤2.49组患者PFS高于NLR＞2.49组,LMR＞3.39组患者PFS高于LMR≤3.39组,差异具有统计学意义(P=0.003、0.004),NLR≤2.66组患者OS高于NLR＞2.66组,LMR＞3.31组患者OS高于LMR≤3.31组,差异具有统计学意义(P=0.025、0.010)。Cox 单因素分析显示,国际预后指数(IPI)评分(P=0.010)、血清LDH水平(P=0.017)、中性粒细胞数(P=0.018)、单核细胞绝对数(P=0.001)、NLR(P=0.003)、LMR(P=0.004)和全身免疫炎症指数(systemic immune-inflammation index, SII)(P=0.005)与睾丸原发性DLBCL患者PFS有关,多因素分析显示,LMR(HR 37.076, 95% CI 4.691~293.037, P=0.001)和NLR(HR 9.069, 95% CI 2.367~34.746, P=0.001)是影响患者PFS的独立危险因素。Cox 单因素分析显示,IPI评分(P=0.034)、ECOG行为评分(P=0.016)、NLR(P=0.025)和LMR(P=0.010)与睾丸原发性DLBCL患者OS有关,多因素分析显示,LMR(HR 0.077, 95% CI 0.008~0.760, P=0.028)和ECOG行为评分(HR 20.013, 95% CI 1.431~279.876, P=0.026)是影响患者OS的独立危险因素。结论 NLR高值、LMR低值是影响睾丸原发性DLBCL患者预后的独立危险因素。
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  血清MAO、5’-NT及SAA联合检测在肝脏疾病诊断中的应用价值

  王华国, 林胜

  标记免疫分析与临床. 2021, 28(3): 423-426. https://doi.org/10.11748/bjmy.issn.1006-1703.2021.03.013

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  目的 探讨血清单胺氧化酶(MAO)、5’-核苷酸酶(5’-NT)、淀粉样蛋白A(SAA)联合诊断肝脏疾病的价值。方法 选择2017年3月至2019年12月我院门诊及住院治疗的110例肝病及100例健康成年人作为研究对象,所有受试者测定血清MAO、5’-NT、SAA水平。收集天冬氨酸氨基转移酶(AST)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)等肝生化指标,比较两组受试者指标差异并分析诊断价值。结果 肝脏疾病组患者血清MAO、5’-NT、SAA水平及肝生化指标AST、ALT水平均显著高于对照组,差异具统计学意义(P<0.05);Pearson相关性分析示,血清MAO、5’-NT水平与肝生化指标AST、ALT指标呈正相关关系(P<0.05);ROC曲线分析示,血清MAO、5’-NT、SAA水平单独诊断肝脏疾病的曲线下面积(AUC)分别为0.754、0.773、0.722,当截点值为9.26 U/L、23.77 U/L、7.26 mg/L时,约登指数最大;MAO+5’-NT、MAO+SAA、5’-NT+SAA、三者联合诊断的AUC分别为0.796、0.784、0.789、0.805,三者联合诊断价值最高。结论 肝脏疾病患者伴有血清MAO、5’-NT、SAA水平的明显升高,临床可将其单独或联合检测用于诊断、评估肝脏病变。
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  miR-196a、SCC、CEA在不同级别宫颈病变中的意义

  何陈伟, 陈亚君, 邹靖, 蒋峰

  标记免疫分析与临床. 2021, 28(3): 427-430. https://doi.org/10.11748/bjmy.issn.1006-1703.2021.03.014

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  目的 探究血清微小RNA-196a(miR-196a)及鳞状细胞癌抗原(SCC)、癌胚抗原(CEA)在不同级别宫颈病变患者外周血中表达与临床意义。方法 选取我院就诊的149例宫颈病变患者(观察组)为研究对象,根据组织学活检诊断分为宫颈上皮内瘤样病变(CIN组)及宫颈癌(宫颈癌组)两组,比较血清miR-196a、SCC、CEA水平差异,应用受试者工作曲线(ROC曲线)评价上述指标单独检测及联合检测对宫颈病变患者中宫颈癌的临床诊断价值。收集其临床资料及血液样本,根据非典型增生的程度将CIN组患者分为CINⅠ、CINⅡ、CINⅢ 3组亚组,比较不同级别CIN患者血清miR-196a、SCC、CEA水平,采用Spearman相关分析CIN患者血清miR-196a、SCC、CEA水平与非典型增生的程度(CIN分级)的关系。结果 宫颈癌组血清miR-196a、SCC、CEA水平明显高于CIN组(P＜0.05);ROC曲线显示,miR-196a指标AUC 0.880(P<0.05),SCC指标AUC 0.863(P<0.05),CEA指标AUC 0.918(P<0.05),联合检测AUC 0.973(P<0.05);单独检测及联合检测血清miR-196a、SCC、CEA水平均可作为宫颈病变患者宫颈癌的诊断效能指标(P均＜0.05);不同级别CIN患者血清miR-196a、SCC、CEA水平组间差异具有统计学意义(P＜0.05);经Spearman相关分析,CIN患者血清miR-196a、SCC、CEA水平与非典型增生的程度(CIN分级)均呈正相关(P均＜0.05)。结论 血清miR-196a、SCC、CEA水平在宫颈病变患者中高度表达,并与非典型增生的程度(CIN分级)呈显著正相关,尽早检测对CIN及宫颈癌治疗提供理论依据。
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  2型糖尿病患者体质指数与糖尿病肾病预后的相关性分析

  李美晔, 曲卫, 钱颖

  标记免疫分析与临床. 2021, 28(3): 431-434. https://doi.org/10.11748/bjmy.issn.1006-1703.2021.03.015

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  目的 通过研究2型糖尿病患者体质指数对糖尿病肾病预后的影响,为临床2型糖尿病患者糖尿病肾病并发症的防治提供依据。方法 选取2016年1月至2018年12月在我院内分泌科收治的2型糖尿病合并糖尿病肾病的患者120例为研究对象。按照中国判断肥胖标准分为4组,A组21例体重过低(BMI<18.5 kg/m²),B组30例体重正常(18.5 kg/m²≤BMI≤23.9 kg/m²),C组35例超重(24.0 kg/m²≤BMI≤27.9 kg/m²),D组34例,肥胖(≥28 kg/m²)。查阅患者的一般资料,如年龄、性别、糖尿病及其糖尿病肾病的病程、化验室检查(蛋白尿、肌酐、尿素氮、血脂、血糖等)、BMI等,根据BMI分组,随访患者治疗后的结局,Kaplan-Meier法描绘生存曲线。结果 4组患者在年龄、性别、糖尿病病史、糖尿病肾病病史、其他糖尿病并发症、白蛋白、球蛋白、空腹血糖、餐后2 h血糖等方面差异无统计学意义(P>0.05)。在血肌酐、尿素氮、24 h蛋白尿定量、eGFR 、胆固醇、三酰甘油,D组患者明显高于A、B、C 3组患者(P<0.05),A、B、C三组患者间差异无统计学意义(P>0.05)。4组患者累积ESRD患病率比较,D组患者明显高于A、B、C 3组患者(P<0.05),A、B、C 3组患者间差异无统计学意义(P>0.05)。结论 肥胖组患者ESRD患病率明显增高。
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  基于CCL3/CCR1轴分析乌司他丁对食管癌患者放射性肺损伤的保护作用

  龙灿, 李成

  标记免疫分析与临床. 2021, 28(3): 435-440. https://doi.org/10.11748/bjmy.issn.1006-1703.2021.03.016

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  目的 探讨乌司他丁对于食管鳞状细胞癌患者放射性肺损伤的保护作用以及可能的分子机制。方法 选取2018年1月至2019年1月在我院进行根治性调强放疗或术后调强放疗的食管鳞状细胞癌患者60例,按照1∶1的比例随机分为对照组和试验组。两组均接受三维适形调强放疗。试验组在放疗前、后连续3d注射乌司他丁,对照组则注射相同体积的5%葡萄糖注射液。采集放疗前和放疗开始后4周、8周、16周、24周时的静脉血样本,检测血浆趋化因子CC基序配体3(CCL3)和C-C趋化因子受体1(CCR1) mRNA表达水平。观察放疗开始后8周和24周肺功能变化和放射性肺损伤的发生情况。结果 根据RTOG分级系统,放疗24周后试验组放射性肺损伤的总发生率和损伤严重程度均低于对照组(P<0.05)。两组都没有发现Ⅳ级放射性肺损伤。同时试验组在第24周肺功能[用力肺活量(FVC)、第1秒用力呼气量(FEV1)、一氧化碳弥散量(DLCO)]降低水平少于对照组(P<0.05)。2组患者放射开始后血浆CCL3和CCR1 mRNA水平逐渐升高,但是在放射后4周、8周、16周、24周时,试验组血浆CCL3和CCR1 mRNA水平均低于对照组(P<0.05)。2组近期临床疗效、随访期间总生存率和生存时间比较无统计学差异(P>0.05)。结论 乌司他丁对于食管癌患者放射性肺损伤具有一定的保护作用,可以改善患者的肺功能,降低血浆CCL3、CCR1 mRNA表达。
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  重症机械通气患者Th17/Treg细胞平衡与困难撤机结局的相关性

  黎宗宝, 詹峰, 白瑞娜

  标记免疫分析与临床. 2021, 28(3): 441-446. https://doi.org/10.11748/bjmy.issn.1006-1703.2021.03.017

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  目的 观察重症机械通气(MV)患者辅助性T细胞17(Th17)/调节性T细胞(Treg)因子失衡与困难撤机结局的关系,以指导未来重症机械通气患者困难撤机结局的评估与干预。方法 选择我院2018年1月至2020年1月收治的214例重症患者作为研究对象,患者有不同程度的自主呼吸困难,均接受MV治疗,对达到撤机标准的患者进行自主呼吸试验(SBT),通过试验者行拔管,观察48h,记录撤机结局。比较不同撤机结局患者的炎症因子[降钙素原(PCT)、C反应蛋白(CRP)、肿瘤坏死因子(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)]水平,Th17细胞因子[白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-17(IL-17)及γ-干扰素(IFN-γ)]水平及Treg细胞因子[转化生长因子-β(TGF-β)、白细胞介素-4(IL-4)及白细胞介素-10(IL-10)]水平,并探讨Th17/Treg细胞平衡状况,分析Th17/Treg细胞失衡对撤机结局的预测价值。结果 214例重症MV患者,有89例发生困难撤机结局,发生率为41.59%;困难撤机组IL-6、IL-17及IFN-γ水平均高于撤机成功组,TGF-β、IL-4及IL-10水平均低于撤机成功组(P<0.05);撤机困难组Th17细胞比例、Th17/Treg高于撤机成功组,Treg细胞比例低于撤机成功组(P<0.05);经Logistic回归分析结果显示,IL-6、IL-17及IFN-γ高水平,TGF-β、IL-4及IL-10低水平,Th17细胞高比例,Treg细胞低比例及Th17/Treg高比值是重症MV患者困难撤机结局发生的危险因素(OR>1,P<0.05);绘制ROC曲线发现,Th17细胞比例、Treg细胞比例、Th17/Treg比值用于重症MV患者困难撤机结局风险预测的AUC均>0.80,有一定预测价值,且以Th17/Treg比值的预测价值高;当各细胞cut-off值取分别取4.180%、4.860%、0.779%时,可得到最佳预测价值。结论 重症MV患者Th17/Treg细胞平衡与困难撤机结局密切相关,Th17/Treg细胞高比例可导致困难撤机发生,可将Th17/Treg细胞作为困难撤机结局的有效预测因子。
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  PCT、Lac、cTnI、cTnT及其联合检测对ICU脓毒症合并AKI患者的诊断价值

  杨超, 冯霞, 黄婧源

  标记免疫分析与临床. 2021, 28(3): 447-451. https://doi.org/10.11748/bjmy.issn.1006-1703.2021.03.018

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  目的 探究血清中降钙素原(PCT)、乳酸(Lac)、快速肌钙蛋白在重症监护病房(ICU)急性肾损伤(AKI)表达中的意义。方法 回顾性分析我院ICU 116例脓毒症合并AKI患者(AKI组)及124例脓毒症未合并AKI患者(非AKI组)临床资料,比较两组基线资料及血清PCT、Lac、肌钙蛋白I(cTnI)、肌钙蛋白T(cTnT)水平差异,使用受试者工作曲线(ROC曲线)评估血清PCT、Lac、cTnI、cTnT及其联合检测对ICU脓毒症患者合并AKI的诊断价值;并根据AKI组患者改善全球肾脏病预后组织(KDIGO)分期分为Ⅰ期组、Ⅱ期组、Ⅲ期组3个亚组,分析ICU脓毒症合并AKI患者KDIGO分期与上述血清学指标的相关性。结果 AKI组与非AKI组性别、年龄、入院主要急症、高血压、糖尿病等基线资料比较,差异无统计学意义(P＞0.05);但AKI组慢性肾功能不全患病率、APACHEⅡ评分及血清PCT、Lac、cTnI、cTnT水平均高于非AKI组(P＜0.05)。经ROC曲线分析,发现血清PCT、Lac、cTnI、cTnT及其联合检测均对ICU脓毒症患者合并AKI具有较高诊断价值(P＜0.05),且联合检测诊断价值最高。经Spearman秩相关性分析,发现ICU脓毒症合并AKI患者KDIGO分期与血清PCT、Lac、cTnI、cTnT水平均呈显著正相关(r=0.358、0.491、0.411、0.402,P＜0.05)。结论 血清PCT、Lac、cTnI、cTnT水平可辅助临床尽早诊断ICU脓毒症患者合并AKI,并判断病情进展情况,指导临床诊疗。
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  血清NGAL在原发性高血压患者早期肾损害及其预后危险分层中的应用价值探讨

  彭玲, 杨渝伟, 俸家富

  标记免疫分析与临床. 2021, 28(3): 452-456. https://doi.org/10.11748/bjmy.issn.1006-1703.2021.03.019

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  目的 探讨血清NGAL(中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白)在原发性高血压(essential hypertention,EH)患者早期肾损害及高血压肾病(essential hypertensive kidney disease,EKD)危险分层中的应用价值。方法 选取EKD组204例,EH组517例,健康对照(healthy controls,HC)组150例,收集其血清尿素(Urea)、肌酐(Creatinine,Cr)、胱抑素C(cystatin C,CysC)、估算肾小球滤过率(estimated glomerular filtration rate,eGFR)、NGAL、补体C1q和尿蛋白/肌酐比值(albumin/creatinine ratio,ACR)等结果,以ACR与eGFR水平对EKD进行不良预后危险分层。分析以上指标与高血压患者肾损害发生的关联程度,采用ROC比较各指标单独或联合诊断EKD的性能,重点观察NGAL、Cr、Ure与Clq在EKD不良预后危险分层中的变化。结果 所观察的肾损害指标,在EH与HC间除Ure外差异均有统计学意义 (P<0.05),在EH与EKD间除C1q外差异均有统计学意义 (P<0.05);与Ure、Cr和C1q相比,ACR、eGFR、NGAL与EKD发生关系更加密切(P<0.05);各指标检测诊断EKD的AUC大小依次为ACR(0.888)、eGFR(0.877)、NGAL(0.856)、Cr(0.820)、Ure (0.717)、Clq(0.548),eGFR /ACR/NGAL联合诊断模式的效能(AUC=0.981)显著高于其他模式(P<0.05);NGAL与Cr在肾损害危险分层中逐层增高,且在相邻两层间差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 血清NGAL对EKD有较好的诊断价值,可作为EKD患者早期肾损害的补充诊断指标。
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  冠心病患者PCI术后血清IL-33、sST2、LP-PLA2水平及其与预后的关系

  尹锐, 贾国渠, 陈巍, 张成伟

  标记免疫分析与临床. 2021, 28(3): 457-461. https://doi.org/10.11748/bjmy.issn.1006-1703.2021.03.020

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  目的 分析冠心病(CHD)患者经皮冠状动脉介入术(PCI)术后血清白介素-33(IL-33)、可溶性生长刺激表达基因蛋白2(sST2)、脂蛋白相关磷脂酶A2(LP-PLA2)水平及其与预后的关系。方法 选取2017年1月至2020年1月我院收治的128例行PCI治疗的CHD患者为研究对象,作为观察组,根据冠状造影结果分为单支病变组(n=48)、双支病变组(n=55)及多支病变组(n=25),并选取同期入院后未行PCI术治疗的CHD患者60例作为对照组,并随访术后6个月不良心血管事件(MACE)发生情况,根据MACE分为MACE组(n=25)和非MACE(n=103),检测血清IL-33、sST2、LP-PLA2水平,采用ROC曲线分析其水平对预后的评估价值。结果 观察组血清IL-33、sST2、LP-PLA2水平高于对照组(P＜0.05);多支病变组血清IL-33、sST2、LP-PLA2水平高于单支病变组和双支病变组,双支病变组血清IL-33、sST2、LP-PLA2水平高于单支病变组(P<0.05);MACE组血清IL-33、sST2、LP-PLA2水平高于非MACE组(P<0.05);Logistic回归分析显示,血清IL-33、sST2、LP-PLA2水平是影响CHD患者PCI术后发生MACE的危险因素(P<0.05);ROC曲线分析显示,血清IL-33、sST2、LP-PLA2水平联合预测CHD预后的灵敏度及特异性均高于单独预测(P<0.05)。结论 CHD患者PCI术后血清IL-33、sST2、LP-PLA2水平升高,可预测冠脉病变程度和预后,值得临床推广。
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  急性髓性细胞白血病免疫分型特点及其与疗效、预后关系的研究

  杨淳, 张莺莺, 张军

  标记免疫分析与临床. 2021, 28(3): 462-465. https://doi.org/10.11748/bjmy.issn.1006-1703.2021.03.021

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  目的 分析急性髓性细胞白血病(AML)免疫分型特点及其与疗效、预后的关系。方法 收集本院收治的86例AML初诊患者的临床资料,统计所有患者的免疫分型结果、治疗1个疗程后的效果及1年内复发情况,分析免疫分型结果特征及其对治疗效果、复发情况的影响。结果 86例AML患者髓系抗原中表达阳性率前五位由高到低依次为:CD33(87.21%)、CD117(86.05%)、CD13(84.88%)、MPO(83.72%)、CD64(41.86%);造血干/祖细胞标记抗原中阳性表达以HLA-DR(58.14%)、CD38(55.81%)、CD34(52.33%)、CD123(50.00%)为主;淋系抗原中阳性表达以CD58(30.23%)、CD9(17.44%)、CD7(13.95%)、CD56(13.95%)为主。1个疗程治疗后,有63例(73.26%)患者获得缓解,4种髓系抗原(CD33、MPO、CD64、CD15)和CD58阳性表达患者的CR率明显高于阴性表达患者;而CD34阳性表达患者的CR率明显低于阴性表达患者,差异均有统计学意义(P＜0.05)。有19例(30.16%)患者在1年内复发,CD34阳性表达、CD64阴性表达患者的复发率明显较高,差异均有统计学意义(P＜0.05)。结论 CD33、CD117、CD13、MPO、CD64是AML患者常见的免疫分子标志物,AML患者的免疫分型与患者的治疗效果存在一定的关联,对预后判断可能具有一定的指导意义。
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  头颈部鳞癌患者1,25-二羟维生素D₃水平及其与细胞免疫状态和预后的相关性

  黄伟, 钟丽萍, 李卫彬, 李莉, 冯耀华, 夏良娥, 赵世元

  标记免疫分析与临床. 2021, 28(3): 466-471. https://doi.org/10.11748/bjmy.issn.1006-1703.2021.03.022

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  目的 探讨1,25-二羟维生素D₃水平对头颈部鳞状细胞癌(head and neck squamous cell carcinoma,HNSCC)患者肿瘤细胞免疫状态及预后的影响。方法 纳入2014年3月至2017年4月我院收治的头颈部鳞癌患者200例,设为HNSCC组,另选取同期在我院健康体检者100例设为对照组;检测两组受试者血清1,25-二羟维生素D₃水平;采用流式细胞分析仪检测外周血T细胞、NK细胞及巨噬细胞水平;Spearman线性方程分析HNSCC患者血清1,25-二羟维生素D₃水平与T细胞、NK细胞及巨噬细胞水平的相关性;随访3年,根据HNSCC患者预后情况分为死亡组和存活组,对比两组患者临床资料,多因素Logistic回归分析影响HNSCC患者预后的独立危险因素;以HNSCC组患者血清1,25-二羟维生素D₃水平中位数为界值,绘制K-M生存曲线,分析低血清1,25-二羟维生素D₃水平组和高血清1,25-二羟维生素D₃水平组3年生存风险。结果 HNSCC组患者血清1,25-二羟维生素D₃水平低于对照组(t=5.103,P<0.001);Spearman线性相关性分析显示,1,25-二羟维生素D₃水平与外周血T淋巴细胞、NK细胞及巨噬细胞水平呈正相关(r=0.579、0.520、0.677,P<0.05);随访3年,200例HNSCC患者出现5例失访,最终195例患者出现47例死亡,据此分组后对比两组患者临床资料显示,死亡组肿瘤分化程度、临床病理分期、淋巴结转移以及血清1,25-二羟维生素D₃水平与存活组比较差异存在统计学意义(P<0.05);K-M生存分析曲线显示,低血清1,25-二羟维生素D₃水平组3年生存风险明显高于高血清1,25-二羟维生素D₃水平组(log-rank χ²=5.641,P=0.018);多因素Logistic回归分析显示,肿瘤低分化(OR=7.682)、临床病理分期III~IV期(OR=6.988)、低血清1,25-二羟维生素D₃水平(OR=0.752)以及淋巴结转移(OR=5.635)是导致HNSCC患者死亡的独立危险因素(P<0.05)。结论 头颈部鳞癌患者体内普遍存在维生素D缺乏,且这种缺乏能够影响患者的免疫状态,且能够增加患者远期预后不良的风险。
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  儿科早期预警评分及常见血常规、炎症标志物对危重症手足口病患儿早期诊断的价值

  吴文静

  标记免疫分析与临床. 2021, 28(3): 472-475. https://doi.org/10.11748/bjmy.issn.1006-1703.2021.03.023

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  目的 探讨儿科早期预警评分(EWS)及常见血常规、炎症标志物对危重症手足口病(HFMD)患儿早期诊断的价值。方法 收集2016年6月至2020年6月我院儿科诊治的120例危重症HFMD患儿(疾病组)和普通型HFMD患儿60例(对照组)的临床资料,比较两组早期预警评分(EWS)、主要血常规检测结果[白细胞计数(WBC)、降钙素原(PCT)和中性粒细胞比例(NEUT)]、炎症标志物[白介素-6(IL-6)、白介素-8(IL-8)、白介素-10(IL-10)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和C反应蛋白(CRP)]水平。采用ROC曲线分析EWS及常见血常规、炎症标志物对危重症HFMD早期诊断价值。结果 疾病组EWS评分、WBC、PCT、NEUT较对照组明显升高(P<0.05),疾病组IL-6、IL-8、IL-10、TNF-α、CRP水平较对照组明显升高(P<0.05),ROC曲线分析提示EWS、常见血常规检查结果、炎症标志物联合检测诊断危重症HFMD曲线下面积、灵敏度和特异性较三者分别检测的高(P<0.05),HFMD患儿EWS评分与WBC、PCT、NEUT、IL-6、IL-8、IL-10、TNF-α、CRP呈明显正相关(P<0.05)。结论 儿科EWS、常见血常规检查结果、炎症标志物联合检测可明显提高危重症HFMD早期诊断,有望为危重症HFMD的早期诊治提供理论依据。
基础研究
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  NLRP3过表达对非小细胞肺癌不同细胞系生物学行为的影响

  杜卫华, 王昌媛, 信芳杰, 宋文, 杨镇翠, 赵鹏, 宗金宝

  标记免疫分析与临床. 2021, 28(3): 476-482. https://doi.org/10.11748/bjmy.issn.1006-1703.2021.03.024

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  目的 探讨慢病毒介导的NLRP3过表达对非小细胞肺癌(NSCLC)A549细胞和NCI-H460细胞的增殖、迁移、侵袭和凋亡的影响,并比较两种细胞系生物学行为的差异,探索NLRP3成为药物开发新靶点或潜在调节因子的可能性。方法 设计并构建NLRP3过表达慢病毒载体,用过表达慢病毒载体和阴性对照慢病毒载体分别感染人NSCLC A549和NCI-H460细胞,获得NLRP3过表达细胞组(O/E组)和阴性对照细胞组(CON组)。采用CCK-8法、细胞划痕实验、Transwell侵袭实验、流式细胞技术分别检测两组细胞的增殖、迁移、侵袭和凋亡的情况。结果 NLRP3过表达对A549细胞的增殖起促进作用,抑制NCI-H460细胞的增殖,其过表达促进A549细胞的迁移和侵袭,抑制A549细胞的早期凋亡。NLRP3过表达对NCI-H460细胞的迁移、侵袭、凋亡均无明显影响。结论 NLRP3过表达促进A549细胞的增殖、迁移和侵袭,抑制早期凋亡,其过表达对NCI-H460细胞的增殖有抑制作用。由此可以推断NLRP3可能成为NSCLC治疗药物开发的新靶标或潜在调节因子。
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  富马酸二甲酯对糖尿病肾病自噬及足细胞功能的影响

  闫丽晶, 张若, 王月, 魏玲云, 田静宇, 黄丽丽, 李佳荣, 李培杰

  标记免疫分析与临床. 2021, 28(3): 483-491. https://doi.org/10.11748/bjmy.issn.1006-1703.2021.03.025

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  目的 探究富马酸二甲酯(DMF)对糖尿病肾病(DN)自噬及足细胞功能的影响。方法 通过对大鼠腹腔注射50 mg/kg的STZ诱导了DN模型,DN组大鼠灌胃2 mL生理盐水,DN+25DMF组、DN+50DMF组和DN+75DMF组分别灌胃25、50和75 mg/(kg·d)的DMF,共治疗12周。检测各组大鼠的血糖、尿蛋白、血清尿素氮和肌酐水平。用Periodic Acid-Schiff(PAS)试剂盒对肾脏进行染色。通过Western blot或免疫荧光染色检测肾脏中nephrin、LC3、p62、p-AMPK、AMPK、p-mTOR、mTOR和p-ULK1的表达。此外,将小鼠足细胞系(MPC5)在高葡萄糖(HG,40 mmol/L)条件下用不同浓度的DMF(10、50和100μmol/L)处理24 h或36 h。使用CCK-8试剂盒测定细胞活力,通过Western blot测定细胞中的LC3和p62蛋白表达水平。结果 与DN组比较,DN+25DMF、DN+50DMF和DN+75DMF组大鼠的血糖、尿蛋白、血清尿素氮和肌酐水平显著降低,肾小球系膜基质明显减少,肾组织中nephrin的表达水平显著升高(P<0.05)。与DN组比较,DN+25DMF、DN+50DMF和DN+75DMF组大鼠肾组织中LC3II的表达水平显著升高,而p62显著降低,大鼠足细胞中的自噬体数目显著升高(P<0.05)。与DN组比较,DN+25DMF、DN+50DMF和DN+75DMF组大鼠肾组织中AMPK、mTOR和ULK1磷酸化显著升高(P<0.05)。与HG组比较,HG+10DMF、HG+50DMF和HG+100DMF组MPC5足细胞的活力显著升高,LC3-II蛋白表达水平显著升高,而p62显著降低(P<0.05)。结论 DMF通过AMPK/mTOR/ULK1途径增强自噬,从而抑制了DN的进展并提高了足细胞功能。
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  Notch1/ROR-γt通路在自身免疫性甲状腺炎发病过程中的作用研究

  赵连春, 牛丽霞, 陈芳, 卢亚敏, 刘光霞

  标记免疫分析与临床. 2021, 28(3): 492-498. https://doi.org/10.11748/bjmy.issn.1006-1703.2021.03.026

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  目的 探讨果蝇双翅边缘缺刻同源基因1(Notch1)/维甲酸相关孤核受体γt(ROR-γt)通路在自身免疫性甲状腺炎(AIT)发病过程中的调控机制,为相关药物研发及临床治疗提供理论参考。方法 免疫组化法测Notch1、ROR-γt分别在桥本氏甲状腺炎组织标本及正常甲状腺组织标本中表达水平。将免疫CBA/j小鼠随机分为正常对照组、模型组、Notch1通路阻断剂(DAPT)组(200 ng/kg),Notch通路激活剂(Jagged1)组(50 ng/kg),每组10只。皮下注射甲状腺球蛋白(mTg)+弗氏佐剂(CFA)建立AIT模型。连续给药3周,1次/周后,ELISA法测血清抗甲状腺球蛋白抗体(TGAb)、甲状腺过氧化物酶抗体(TPOAb)水平;计算甲状腺指数;HE法观察组织形态学变化;TUNEL法测细胞凋亡率;免疫组化法测Notch1与ROR-γt阳性表达水平;Western blot法测肿瘤坏死因子(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)、叉头状螺旋转录因子3(Foxp3)蛋白表达水平。结果 桥本氏甲状腺炎组织中Notch1、ROR-γt蛋白表达高于正常甲状腺组织(P＜0.05)。模型组小鼠甲状腺结构破坏严重,甲状腺指数、血清TGAb、TPOAb水平、滤泡上皮细胞凋亡率、Notch1、ROR-γt、TNF-α、IL-6、TRAIL表达升高(P＜0.05),Foxp3表达降低(P＜0.05)。激活Notch1/ROR-γt通路小鼠甲状腺结构损伤进一步加重,阻断Notch1/ROR-γt通路小鼠甲状腺结构损伤缓解,且上述相关指标变化差异均有统计学意义(P＜0.05)。结论 Notch1/ROR-γt通路激活参与AIT炎症损伤及滤泡上皮细胞凋亡过程,抑制Notch1/ROR-γt通路激活,可缓解AIT小鼠甲状腺结构损伤。
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  长链非编码RNA SNHG5在胰腺癌中的表达及作用研究

  赵琳琳, 沈国双, 袁凯善, 刘占峰

  标记免疫分析与临床. 2021, 28(3): 499-504. https://doi.org/10.11748/bjmy.issn.1006-1703.2021.03.027

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  目的 研究长链非编码RNA小核仁RNA宿主基因5(lncRNA SNHG5)在胰腺癌组织中的表达水平及其临床意义,并探讨lncRNA SNHG5在胰腺癌中的生物学作用。方法 采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR) 检测 lncRNA SNHG5在42例胰腺癌组织及其邻近的非癌组织中的相对表达量,并分析胰腺癌组织中SNHG5的相对表达量与患者临床病理参数的关系。SNHG5 siRNA转染胰腺癌细胞系PANC-1,分为si-NC组和si-SNHG5组,采用qRT-PCR检测SNHG5 siRNA转染效果。成功沉默SNHG5的表达后,采用CCK8实验检测细胞的增殖能力,Transwell实验检测细胞的转移能力,流式细胞仪检测细胞凋亡,Western blotting检测细胞中β-catenin、cMYC和BCL-2蛋白的表达情况。结果 qRT-PCR结果显示lncRNA SNHG5在胰腺癌组织中的相对表达量高于非癌组织(P<0.05),其相对表达量与TNM分期和淋巴结转移有关(P<0.05)。沉默PANC-1细胞中lncRNA SNHG5的表达后,细胞的增殖和转移能力下降,细胞凋亡增多,细胞中β-catenin、cMYC和BCL-2蛋白的表达减少。结论 lncRNA SNHG5在胰腺癌中表达上调,且其表达水平与TNM分期和淋巴结转移有关。lncRNA SNHG5可能是通过调控β-catenin、cMYC和BCL-2蛋白的表达促进胰腺癌的发生发展。
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  过表达miR-122对异氟烷致PC12细胞损伤的保护作用

  陈霞, 陆丽, 耿明倩, 李志刚, 吴皎卿

  标记免疫分析与临床. 2021, 28(3): 505-509. https://doi.org/10.11748/bjmy.issn.1006-1703.2021.03.028

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  目的 探讨miR-122在异氟烷导致的PC12细胞损伤中的作用。方法 将PC12细胞分为对照组、异氟烷组、阴性对照组(NC组)和miR-122过表达组,除对照组外,其余组细胞均用2%异氟烷+21% O₂+5% CO₂处理6h,miR-122过表达组和NC组在用异氟烷处理前通过脂质体2000将miR-122 mimic和mimic-NC转染细胞。通过RT-qPCR检测各组细胞中miR-122表达水平;MTT检测各组细胞处理0、24、48、72h后的细胞活力;ELISA试剂盒检测各组细胞MDA、SOD、GSH-Px水平;通过流式细胞仪检测各组细胞凋亡情况;Western-blot检测各组细胞Bax、Bcl-2、cleaved-Caspase-3蛋白表达。结果 与对照组相比,异氟烷组细胞中miR-122相对表达量、24、48、72h细胞吸光度值、Bcl-2蛋白表达、SOD和GSH-Px水平下降(均P＜0.05),MDA水平、细胞凋亡率、Bax和cleaved-Caspase-3蛋白表达升高(均P＜0.05)。与异氟烷组相比,miR-122过表达组miR-122相对表达量、24、48、72h细胞吸光度值、Bcl-2蛋白表达、SOD和GSH-Px水平显著升高(P＜0.05),MDA水平、细胞凋亡率、Bax和cleaved-Caspase-3蛋白表达下降(P＜0.05)。结论 过表达miR-122能够改善异氟烷诱导的PC12细胞活力降低和氧化应激水平,并抑制细胞凋亡。
方法研究
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  对比快速染色法与革兰氏染色法对阴道炎的诊断价值

  肖征, 章京楠, 曹正, 翟燕红

  标记免疫分析与临床. 2021, 28(3): 510-513. https://doi.org/10.11748/bjmy.issn.1006-1703.2021.03.029

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  目的 对比分析快速染色法与革兰氏染色法在阴道分泌物涂片检查中的应用效果及在阴道炎诊断中的价值。方法 回顾性选取北京妇产医院2019年10月至2019年11月疑诊的阴道炎患者120例作为研究对象(其中116例确诊为阴道炎),以无菌棉拭子采集患者阴道分泌物并制作成2组样本,分别进行快速染色法与革兰氏染色法检测。根据临床症状、体征、实验室结果做出临床诊断。统计快速染色法与革兰氏染色法对病原体检出的数量、灵敏度、特异性、准确率及两种方法的经济成本与效率,分析它们之间的差异。结果 120例患者中,革兰氏染色法与快速染色法分别检出病原体101、97例,其中线索细胞分别为52、48例,真菌分别为30、31例,滴虫均为2例,混合感染分别为17、16例,2种方法各病原体检出率差异无统计学意义(均P>0.05);且120例疑诊阴道炎患者经确诊后,阴道炎116例,非阴道炎4例。快速染色法与革兰氏染色法检出阴道炎分别为97与101例,非阴道炎分别为23与19例,与确诊结果一致数分别为101与105例;同时2种检测方法病原体检出的灵敏度、特异性、准确率比较,差异均无统计学意义(均P>0.05);且快速染色法的经济成本更低,操作时长更短。结论 快速染色法检测结果准确、灵敏,特异性好,且与革兰氏染色法检测结果对比差异无统计学意义,但经济成本更低,操作时长更短,效率更高。
实验室质量管理
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  北京协和医院定量生化和免疫检验报告取消审核状况分析及改进策略

  李鹏昌, 程歆琦, 夏良裕, 刘文静, 王军, 张强兴, 鲁军, 邱玲

  标记免疫分析与临床. 2021, 28(3): 514-518. https://doi.org/10.11748/bjmy.issn.1006-1703.2021.03.030

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  目的 分析检验报告取消审核的原因,探索实验室信息系统改进方法,降低检验报告不正确率。方法 回顾分析2019年1月1日至12月31日北京协和医院检验科定量生化和免疫检验报告取消审核的标本信息,计算取消审核率,分析取消审核原因、取消审核的时间和不正确报告打印率等指标。结果 定量生化和免疫检验标本总数为2 134 723份,取消审核标本数为1 054份,总体取消审核率为万分之4.94。所有取消审核报告中,已打印率为15.4%。最常见的取消审核原因为标本复检、修改尿量、补录备注信息和样本需要稀释,占全部取消审核报告的比例分别为43.8%、22.6%、14.2%和6.1%。在信息系统中增加审核报告后延迟10、30、60、90 min或120 min发送结果,将分别使不正确报告率下降18.4%、27.5%、37.1%、43.0%和45.9%。结论 需要定期汇总和分析检验结果取消审核率,优化实验室信息系统的功能可以有效降低检验报告不正确率。
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  南京市2016年至2020年常规化学室间质评结果分析

  王一杉, 董林, 张瑞生, 梅燕萍

  标记免疫分析与临床. 2021, 28(3): 519-523. https://doi.org/10.11748/bjmy.issn.1006-1703.2021.03.031

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  目的 分析南京市二级以上实验室常规化学检测结果,考核不同实验室间结果的可比性。方法 收集2016年至2020年全市各参评实验室常规化学室间质评回报结果,分析22个回报项目的合格率及变异系数。结果 五年来质评结果合格率均稳定在93%以上,PT合格率较高的是淀粉酶(平均99.49%)、肌酸激酶(平均99.09%),三酰甘油(平均99.07%),较低的是氯(平均88.14%)、钙(平均90.65%)。钙的平均CV值高于卫生部临床检验中心室间质量评价标准。结论 随着各实验室检测水平的提高,各项目PT合格率稳定,CV值保持稳中有降的趋势。钙测定由于方法学的原因,采用离子选择性电极法进行测定CV值较大,各级医院在上报该项目时需注意方法学的选择。
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  HISCL5000全自动高敏免疫分析仪传染病项目性能验证分析

  王凡强, 曲婧, 李世浩, 吴红丽, 张辉

  标记免疫分析与临床. 2021, 28(3): 524-528. https://doi.org/10.11748/bjmy.issn.1006-1703.2021.03.032

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  目的 根据ISO15189认可的要求和临床的实际需求,对HISCL-5000全自动高敏免疫分析仪进行性能验证,从而保证临床样本检验的准确性。方法 对HISCL-5000高敏免疫分析仪分别进行本底计数、批内精密度、批间精密度、线性验证、符合率(比对)、准确性、检出限的验证。结果 HISCL-5000高敏免疫分析仪检测传染病HBsAg、HBsAb、HBeAg、HCV-Ab、TP-Ab和HIVAg+Ab低浓度批内精密度CV分别为1.84%、3.82%、2.00%、1.96%、8.10%、1.45%;高浓度批内精密度CV分别为4.15%、1.60%、1.74%、1.52%、3.67%、1.57%,HBeAb低浓度批内精密度CV为5.23%,HBeAb高浓度批内精密度CV为2.83%。低浓度和高浓度样本批间精密度CV分别为HBsAg 1.96%、2.06%,HBsAb 3.64%、4.53%,HBeAg 3.29%、2.62%,HCV-Ab 2.30%、2.40%,TP-Ab 5.70%、8.17%,HIVAg+Ab 4.53%、2.53%,高浓度HBeAb 6.73%,低浓度HBeAb 1.40%。HBsAg 和HBsAb线性验证R²值均>0.95,符合验证要求。两台仪器HBsAg 和HBsAb定量检测结果符合率Kappa≥0.75,表示两台仪器的结果高度一致。HBsAg定量检测准确度偏差<10%,符合率大于90%以上,传染八项检出限验证结果全部合格,仪器符合性能验证要求。结论 HISCL-5000全自动高敏免疫分析仪检测传染八项结果准确性较高,可靠性较好,检验速率高效,随时满足临床需求,临床应用价值较高。
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  PDCA循环在提升实验室新冠病毒检测能力中的应用

  张龙锋, 刘强, 阴晴

  标记免疫分析与临床. 2021, 28(3): 529-531. https://doi.org/10.11748/bjmy.issn.1006-1703.2021.03.033

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  目的 应用PDCA循环提升我院新型冠状病毒核酸检测能力,提高临床、患者的满意度。方法 比较2020年2月至4月(改善前)和2020年5月至8月(改善后)的新冠病毒核酸检测报告例数及申请到报告TAT时间的数据,采用SPSS 24.0软件进行数据的统计与分析。结果 经过PDCA循环后,新冠病毒核酸报告的检测量由28例/月提高到11 465例/月,改善前后两者比较差异具有统计学意义(P<0.05);同时TAT中位数(申请到报告)由1 438±545 min下降至461±46 min。7月末改进周末排班方式后,周末的核酸检测TAT(申请到报告)平均时间由2 364±645 min下降至1 408±304 min,两者比较差异具有统计学意义(P<0.05)。结论 应用PDCA 循环提升了检测能力、缩短了新冠病毒核酸检测TAT(申请到报告),提高了临床患者满意度。
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  电感耦合等离子体质谱法与原子吸收光谱法在测定微量元素中的比较分析

  贾永娟, 雒琴, 刘春冉, 倪君君

  标记免疫分析与临床. 2021, 28(3): 532-536. https://doi.org/10.11748/bjmy.issn.1006-1703.2021.03.034

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  目的 采用电感耦合等离子体质谱法(ICP-MS)和原子吸收光谱法(AAS),分别检测临床患者全血样本中6种微量元素(钙、镁、铁、锌、铜、铅),并从方法学、检测结果两个方面进行分析和比较,便于医学实验室能够根据自身实际需求选择合适的检测方法。方法 分别建立了ICP-MS和AAS检测全血中6种微量元素的前处理方法及仪器分析方法,并从准确度、精密度、灵敏度、线性范围进行方法学的比较。并征集不同性别、不同年龄段的90名志愿者,分别使用两种方法对90例实际临床样本进行检测,使用专业的数据统计软件SPSS 20.0对测定结果进行处理。结果 ICP-MS和AAS两种方法的准确度、精密度均良好,灵敏度和线性范围也均能满足临床检测要求,90例样本的比对结果显示,两种方法的检测结果呈线性相关(R²>0.97),且差异无统计学意义(P＞0.05)。结论 两种方法均能满足临床样本的检测要求,但二者各有优劣势,医学实验室可以根据自身实际需求选择合适的检测方法。
临床实践管理
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  手机APP在新生儿高胆红素血症早期筛查中应用研究

  王绍胜, 马洪, 邹璐, 马丽, 高文文, 易兴琴, 陈凤娇

  标记免疫分析与临床. 2021, 28(3): 537-540. https://doi.org/10.11748/bjmy.issn.1006-1703.2021.03.035

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  目的 研究应用智能手机APP软件对新生儿的额头、胸部进行拍照后计算新生儿胆红素(automated image-based bilirubin, AIB)值,为建立适合于农村地区的简便、易行的新生儿高胆红素血症早期筛查机制提供科学依据。方法 选择2019年6月至2020年12月在我院出生的新生儿科住院疑似新生儿高胆红素血症患儿500例,平均出生胎龄37周+3 d,平均体重 2.7±0.7 kg,出生日龄 8±4 d,男263例、女237例。同时测定其血浆总胆红素值(serum total bilirubin, TSB)、经皮测定胆红素(transcutaneous bilirubinometry,TcB)及AIB值。AIB值由苹果11手机拍照后所得(部分为对照采用华为Mate 20)。结果 数据均显示AIB与血浆TSB差异无统计学意义(P=0.10);AIB与TcB差异无统计学意义(P=0.15);TSB与TcB差异无统计学意义(P=0.11);不同品牌手机[苹果11(205±38μmol/L)、华为Mate 20(200±41μmol/L),t=1.70,P=0.14]、不同检测部位[额头(211±48μmol/L)、胸部(201±52μmol/L),t=1.73,P=0.12]等亚组 AIB结果差异无统计学意义。结论 智能手机APP软件对新生儿的额头、胸部进行拍照后计算新生儿胆红素(automated image-based bilirubin, AIB)值能满足患儿家长监测黄疸的需求,为新生儿高胆红素血症随访监测提供了一项方便可靠的新方法。